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Le Plateau Technique « Microscopie Electronique de la Cellule » |
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Le plateau technique de microscopie électronique, créé en 2008, est installé au sein de l'Institut des Neurosciences de Grenoble (GIN). Ce plateau est dédié à l'étude ultrastructurale de la cellule et des tissus et permet d'obtenir des images de l'intérieur de la cellule avec une résolution de l'ordre du nanomètre.
Le personnel de la plateforme de microscopie électronique se compose d'un ingénieur de recherche et d'une technicienne. Bien plus que des opérateurs très qualifiés, ils sont aussi régulièrement amenés à adapter les protocoles, conseiller et former les microscopistes qui souhaitent utiliser les équipements de la plateforme.
Techniques utilisées sur la plateforme :
- La technique d'inclusion des cellules dans une résine epoxy que l'on peut ensuite couper avec un ultramicrotome en sections ultrafines de 60nm d'épaisseur. Comme il est parfois nécessaire d'observer la même cellule en microscopie optique et électronique, nous avons développé des techniques de microscopie corrélative afin d'observer un même phénotype aussi bien par le biais de la microscopie à fluorescence que par celui de la microscopie électronique à transmission.
- La technique de Tokuyasu pour la localisation des protéines au sein de la cellule. Celle-ci consiste à congeler les cellules ou les tissus dans de l'azote liquide après une étape de cryoprotection dans le sucrose et de les couper à froid (-120°C) en section de 40-50nm avec un ultra-cryo-microtome. Nous réalisons ensuite un immunomarquage sur ces coupes en utilisant un anticorps secondaire couplé à des particules d'or pour révéler la présence de l'anticorps primaire dirigé contre la protéine d'intérêt.
La plateforme de microscopie électronique travaille en étroite collaboration avec les chercheurs des laboratoires grenoblois pour l'étude des intéractions des molécules d'intérêt avec les différentes structures cellulaires
Technologies:
- Microscope électronique à transmission (JEOL 1200EX)
- Caméra Numérique (Veleta, SIS)
- Evaporateur (JEOL)
- Ultra-(Cryo)-microtome (Ultracut - Leica)
Contact
Responsable technique : Karin PERNET-GALLAY
Marketing & Sales Manager Marie-Gabrielle Jouan +33 (0)4 76 00 00 61
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